1、聚合酶反應分析儀溫度校準裝置校準的范圍

本規范適用于測量范圍為(0～120)℃以?xún)鹊木酆厦告湻磻治鰞x溫度校準裝置的校準。

2、引用文件

本規范引用下列文件：

YYT  1173-2010  聚合酶鏈反應分析儀

凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規范；凡是不注日期的引用文件，

其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規范。

3、術(shù)語(yǔ)

3.1聚合酶鏈反應分析儀(polymerase chain reaction analyzer)

基于聚合酶鏈反應(PCR) 技術(shù)原理，模擬DNA或RNA的復制過(guò)程，在模板、引物、聚 合酶等存在的條件下，特異擴增已知序列，對其進(jìn)行檢測分析的儀器設備。也稱(chēng)基因擴

增儀。

4、聚合酶反應分析儀溫度校準裝置校準的概述

聚合酶鏈反應分析儀溫度校準裝置由單通道或多通道測溫模塊、數據采集模塊、數據線(xiàn)和顯示器(計算機)等組成，其測溫模塊的結構能夠模擬聚合酶鏈反應分析儀(以下簡(jiǎn)稱(chēng)PCR儀)樣品反應管的外形結構，主要用于校準PCR儀的溫度特性，其組成框圖如

圖1所示。

a) 測溫模塊   b) 數據采集模塊    c) 顯示器

圖1PCR儀溫度校準裝置組成框圖

5、計量特性

5.1 溫度示值

PCR 儀溫度校準裝置溫度示值的最大允許誤差為±0.20℃。

注：上述指標不作為合格判定依據。

6、校準條件

6.1環(huán)境條件

6.1.1環(huán)境溫度：(15～25)℃;

環(huán)境濕度：≤85 %RH。

6.1.2電測設備對環(huán)境溫濕度等另有要求時(shí)，應滿(mǎn)足其相應規定。

6.1.3校準時(shí)，供PCR儀溫度校準裝置、恒溫設備和電測設備使用的電源應分別符合相應要求。

6.2測量標準及其他設備

校準時(shí)，可選用表1所示的測量標準及其他設備。

表1校準用測量標準及其他設備

7、校準項目和校準方法

7.1校準項目

PCR儀溫度校準裝置的校準項目為溫度示值。

7.2校準方法

7.2.1校準前的檢查

7.2.1.1外觀(guān)檢查

目測檢查PCR儀溫度校準裝置應外觀(guān)良好，各通道溫度傳感器無(wú)彎折、斷裂、污染，傳感器封裝、引線(xiàn)插件接觸良好。

7.2.1.2  顯示功能檢查

可在溫度示值校準時(shí)進(jìn)行檢查。

PCR 儀溫度校準裝置各通道溫度顯示應符合其分辨力要求，顯示數字及圖像應清晰，小數點(diǎn)和狀態(tài)顯示應正確。當溫度超出測溫范圍或傳感器發(fā)生故障時(shí)，應能實(shí)時(shí)顯示其相應的通道號。

7.2.2校準前的準備

a)開(kāi)啟電測設備進(jìn)行預熱，預熱時(shí)間至少20min或滿(mǎn)足其使用說(shuō)明書(shū)的相應要求；

b)預先凍制好水三相點(diǎn)瓶；

c)將標準鉑電阻溫度計放入凍制好的水三相點(diǎn)瓶中，測量其水三相點(diǎn)值。將新測

得的水三相點(diǎn)值輸入配套電測設備使用；

d)按恒溫槽使用說(shuō)明書(shū)的要求，保證其工作區域的液面處于規定液位；

e)備好圖2所示的PCR儀溫度校準裝置校準用的全浸式專(zhuān)用等溫塊或局浸式專(zhuān)用等溫塊，并保持其內部清潔。

a) 局浸式等溫塊b) 全浸式等溫塊

圖2 專(zhuān)用等溫塊示意圖

f) 將PCR儀溫度校準裝置的測溫模塊安裝于專(zhuān)用等溫塊中，如圖3所示。測溫模塊的溫度傳感器應無(wú)縫隙置入等溫塊測試孔內，保證溫度傳感器與等溫塊貼合緊密。無(wú)自重結構的測溫模塊需在其上方加壓封條，使其與等溫塊接觸緊密。等溫塊內應填充脫脂棉、泡沫塑料、真空隔熱板等絕熱材料，使測溫模塊與外部環(huán)境絕熱。

 a) 局浸式等溫塊  b)全浸式等溫塊

圖3 測溫模塊在專(zhuān)用等溫塊中的安裝示意圖

g) 將安裝了測溫模塊的等溫塊放置于恒溫槽內，等溫塊的浸沒(méi)深度應不低于180mm。

h) 將標準鉑電阻溫度計插入專(zhuān)用等溫塊驗證孔內，插入深度應不低于180mm, 其感

溫部分應與等溫塊底部保持水平。

i)將PCR儀溫度校準裝置的測溫模塊與其主機相連，并開(kāi)機預熱，進(jìn)入測量狀態(tài)，預熱時(shí)間至少10min。